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名稱	規(guī)格	單位
溶痰劑	250mlx4	盒

應(yīng)用  BIOLAI 溶痰劑提高血抗酸桿菌涂片陽性率

提高臨床標(biāo)本中抗酸桿菌涂片陽性率問答

 

 

1、是什么原因造成抗酸染色假陽性呢？脫色沒脫干凈嗎？

答：造成假陽性的原因有：

①第一液加的量少，在染色期間出現(xiàn)干燥.

②沖完第一液后，未將水瀝干，脫色液加的量少，脫色時間短（一般脫色2分鐘），脫色不徹底.

③痰液中的食物殘?jiān)?/span>

 

2、我們用夾層杯，胸腹水和腦脊液要一定要NaOH處理嗎？

如果夾層杯制作的片子，脫色時沒有涂膜脫落現(xiàn)象，可以不用處理。

 

3、請問所有離心操作都是加蓋離心嗎？所有離心管都是一次性的嗎？成本如何？

答：我們結(jié)核室所有離心都是低溫離心，所有離心管都是一次性尖底離心管，成本沒計算過。

 

4、老師提到蒸餾水最好要新鮮的，新鮮蒸餾水如何獲得呢？滅菌后放置一段時間的可以嗎？

答：新鮮蒸餾水可以從生化制水機(jī)中取，滅菌后放置冰箱可以。

 

5、請問老師，多次離心，會增加感染的機(jī)會嗎？

答：是的，可以考慮購買帶安全罩的低溫離心機(jī)

 

6、我們用的也是消化離心夾層杯法，試劑商說NaOH能殺死抗酸菌。對此我表示懷疑，然后做了三次試驗(yàn)，將消化后的標(biāo)本去培養(yǎng)，其中有兩次是培養(yǎng)陰性，一次培養(yǎng)陽性。所以，我想知道NAOH到底能不能殺死抗酸菌？

答：能殺死20%-90%的分枝桿菌

 

7、老師，你們痰標(biāo)本陽性率很高了。標(biāo)本合格率怎么樣；數(shù)據(jù)統(tǒng)計按人次，還是標(biāo)本次數(shù)； 還有就是剛才老師提到及時痰、夜間痰和晨痰，這3類標(biāo)本哪種陽性率高?

答：標(biāo)本合格率沒統(tǒng)計過，最開始開展結(jié)核檢查時，標(biāo)本質(zhì)量挺好的，后來質(zhì)量有所下降，我最初是將做病理、做一般菌檢測的標(biāo)本都收集過來，做涂片或培養(yǎng)。數(shù)據(jù)統(tǒng)計是按人次，有時，一個病人可能會做2-3次涂片，有一張陽性我們就按陽性處理。文獻(xiàn)說晨痰陽性率高。

 

8、沒有NaOH，用KOH可以嗎，濃度也一樣嗎?胸腹水加抗凝劑是否會影響培養(yǎng)?還是說加抗凝劑僅用于結(jié)核涂片

答：文獻(xiàn)中均為NaOH消化，我們沒試過KOH消化，可以試試看。加抗凝劑是否會影響培養(yǎng)，肝素和SPS抗凝不影響培養(yǎng)，EDTA抗凝會影響培養(yǎng)。

 

9、請問痰液所用離心管是哪種類型？

答：50ml尖底離心管。BD和拱東均有售。

 

10、老師您好！我想問：1您提用晨尿可以提高陽性率，但在菌量少的情況下，是不是像書里留24小時的尿，但沒有防腐有影響嗎？2肝素抗凝的標(biāo)本有影響一般細(xì)菌培養(yǎng)？（因?yàn)槲覀冏鲆话慵?xì)菌培養(yǎng)還要做涂片，醫(yī)生送一管無菌管的給我們

答：涂片可以使用24小時尿液，但要注意冷藏和無菌操作，不要加防腐劑。肝素和SPS抗凝不會影響一般菌培養(yǎng)。

 

11、水洗標(biāo)本時蒸餾水用40到50ml，用什么容器離心！我們就是一般離心機(jī)，怎么用？

答：可以先將標(biāo)本倒入15ml尖底離心管，如果標(biāo)本量多時，可用多個離心管離心，離心后，去上清，集中到一管，再用蒸餾水加至15ml洗，混勻，離心，去上清，加3滴蒸餾水混勻涂片。

 

12、請問老師有沒有做過細(xì)胞離心機(jī)對提高腦脊液結(jié)核桿菌檢出率的影響？

答：沒做過

 

13、我們實(shí)驗(yàn)室的就有許多小離心機(jī)，上面的數(shù)值都可以達(dá)到3800g，可信嗎？

答：這個問題可以咨詢廠商，我們用的是可以放50ml尖底離心管的進(jìn)口低溫離心機(jī)。

 

14、請教各位老師，你們化痰劑消化痰消化多長時間？

答：我們一般為5-10分鐘左右。

 

15、請教老師化痰劑哪家生產(chǎn)？

答：有珠海貝索、濟(jì)南博萊等廠家。

 

16、抗酸桿菌的室內(nèi)質(zhì)控怎么做？

答①自查和互查：抽查復(fù)檢當(dāng)日10%涂片，并做登記。要求：抗酸桿菌陽性片符合率≥98%，陰性片符合率≥96%，不允許1+以上的陽性片出現(xiàn)假陰性。

②涂片脫落面積應(yīng)在10%以下。

 ③抗酸染色每天染自制的陽性和陰性質(zhì)控片，熒光染色每批次均要染自制的陽性和陰性質(zhì)控片，監(jiān)測染液質(zhì)量和染色效果合格。

 

17、老師，你們陽性率好驚人！我們用的是濃縮消化離心夾層杯法，平均每天30個左右的痰標(biāo)本，陽性率是30左右。請問你們的痰標(biāo)本是多少呢？

答：我們每天涂片量平均在50-70張，標(biāo)本種類比較復(fù)雜：膿、體液、糞便、灌洗液、拭子等。

 

18、請問，直接涂片法玻片在生物安全柜紫外燈照射1小時可以把結(jié)核桿菌殺死嗎？在基層醫(yī)院，工作量大，人員不足的情況下，如何做到自身保護(hù)？需要注意哪些問題

答：①不能殺死，在自然條件下結(jié)核桿菌在室內(nèi)陰暗潮濕處能存活半年;在干燥的痰中于陰暗處可存活6～8 個月;在隨塵土飛揚(yáng)的空氣中可保持傳染性8～10d;在污染的圖書上可存活3 個月;3℃條件下存活1 年,-6～-8℃環(huán)境下可存活4～5 年。結(jié)核分枝桿菌對環(huán)境理化因子抵抗力比一般細(xì)菌繁殖體強(qiáng)。對濕熱敏感，65℃加熱30 分鐘或80℃以上加熱5 分鐘就可以將其殺滅，痰標(biāo)本中結(jié)核菌需在100℃煮沸5 分鐘才可殺滅。結(jié)核分枝桿菌對干燥和干熱耐力較強(qiáng)，在干燥痰中可存活數(shù)周。干熱180℃作用2h 可達(dá)到殺菌目的,殺滅痰中的結(jié)核桿菌則需3h 以上。結(jié)核分枝桿菌對紫外線敏感，日光照射2 小時以上可殺滅暴露在物體上的細(xì)菌，紫外線燈照射可殺滅物體表面和空氣中結(jié)核分枝桿菌。結(jié)核分枝桿菌對多數(shù)化學(xué)消毒劑比較敏感，75％酒精作用5 分鐘即可將其殺滅；5％的苯酚或來蘇兒均可在５分鐘內(nèi)將其殺滅；1000mg/L  CH3COOOH 作用２小時可殺滅尿液內(nèi)和痰中的結(jié)核分枝桿菌。

②標(biāo)本處理、結(jié)核菌涂片染色、培養(yǎng)和藥物敏感實(shí)驗(yàn)、免疫血清學(xué)檢查等檢測可在生物安全II級實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

③實(shí)驗(yàn)室配置生物安全柜、低溫冷凍離心機(jī)、N95口罩、一次性防護(hù)衣、一次性鞋套、一次性帽子、最好配備負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室。不要邊加熱邊涂片，涂片自然干燥后固定染色。

 

19、結(jié)核桿菌抗酸染色陽性，弱抗酸是陽性嗎？

答：結(jié)核桿菌弱抗酸是陽性。

 

20、老師，你提到的血漿，如果血常規(guī)的血標(biāo)本經(jīng)過離心后得到的血漿可以用嗎？

答：如果用患者血漿，1:15稀釋后做涂片，如果抗酸桿菌鏡檢陰性，可以使用。

 

21、溶痰劑需滅菌嗎？

答：不需要，它本身有消毒作用。

 

22、請問，溶痰劑可以用84液配置嗎？

答：84里面穩(wěn)定劑等添加劑多，最好購買商品化的溶痰劑。

 

23、老師，紫外燈照射玻片的距離1米和0.5米的滅菌效果有沒有區(qū)別？

答：沒研究過

 

24、老師，對于骨與關(guān)節(jié)結(jié)核感染臨床診斷非常困難，我們實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常收到關(guān)節(jié)液或術(shù)中組織，老師在這兩種標(biāo)本結(jié)核菌涂片方面有什么經(jīng)驗(yàn)方法可以提高陽性率的？

答：關(guān)節(jié)液如果不是膿性，可以參照胸腹水涂片方法；如果是膿性，用2%-4%的氫氧化鈉消化，再用蒸餾水或PBS稀釋堿性，離心，去上清，加3滴蒸餾水混勻涂片，切記涂片要薄。如果是組織，可以用剪刀剪碎，再用2%-4%的氫氧化鈉消化，消化時間1小時左右，后續(xù)操作同膿。記住剪刀用后要用酒精消毒，流水多沖洗幾遍，防止交叉污染。

 

25、請問老師，就是血漿用生化，或者血常規(guī)的都可以嗎，另外你們的抗酸染色用儀器和手工染色兩者陽性率有區(qū)別嗎？

答：血漿建議用血庫獻(xiàn)血者的血漿，我們涂片曾經(jīng)做過患者的血液抗酸桿菌涂片1+的結(jié)果，如果用患者血漿，稀釋后做涂片，如果抗酸桿菌鏡檢陰性，可以使用。

儀器染色和手工染色沒比對過，我們是偶爾使用儀器染色，出現(xiàn)過涂膜脫落現(xiàn)象。

 

26、請問自動染色儀加熱到50度與火焰固定效果有差別嗎?

答：我們是沒試過，可以一份標(biāo)本涂兩張，試試看。